توضیحات
محلول تریپسین-EDTA ساخت کمپانی سیگما 100 سی سی با کد t4049 که طبق فرمول خاصی توسط محققان ارائه وبه کار گرفته شد. این محلول برای مصارف بیوشیمیایی و معرف ها کاربرد دارد که در کشت سلولی و بیولوژی سلولی هم استفاده می شود اگر به دنبال تهیه این نوع از محصول هستید می توانید از طریق شماره های مندرج در وبسایت با همکاران ما در مجموعه ماینولب در ارتباط باشید تا ضمن ارائه قیمت اطلاعات کامل را در مورد این نوع از محصول در اختیار شما قرار دهند.
محلول تریپسین چیست
تریپسین از یک پلی پپتید تک زنجیره ای 223 باقیمانده اسید آمینه تشکیل شده است که با حذف هگزاپپتید N ترمینال از تریپسینوژن تولید می شود که در پیوند پپتید Lys – lle شکسته می شود. توالی اسیدهای آمینه توسط 6 پل دی سولفید به طور متقاطع پیوند داده می شود. این شکل بومی تریپسین بتا تریپسین است. بتا تریپسین می تواند اتولیز شود و در باقی مانده Lys-Ser شکسته شود و آلفا تریپسین تولید کند. تریپسین عضوی از خانواده سرین پروتئاز است
کاربرد محلول تریپسین
کاربرد معمول این محصول در حذف سلولهای چسبنده از سطح کشت است. غلظت تریپسین لازم برای بیرون راندن سلولها از بستر آنها در درجه اول به نوع سلول و سن کشت بستگی دارد.
از محلول تریپسین-EDTA استفاده شد:
در جدا کردن سلولهای سرطانی روده بزرگ انسان HT29 کشت شده در RPMI 1640 که با 10٪ سرم گوساله جنین تکمیل شده بود در طول تعیین فراوانی سلول نسبی نمونه های با غلظت بالا.
برای آزمایش تریپسیناسیون سلولهای tcA-201 کلیه جنینی انتقال یافته موقت استفاده می شود.
• برای آزاد سازی آنزیمی سلولهای فیبروبلاست موش (رده سلولی L929) متصل به داربست در طی کشت سلولی برای ارزیابی تأثیر چندین درمان اصلاح شده داربست و الیاف غیربافته لاکتید پلی (L / D) اصلاح شده .
اقدامات بیوشیمی / فیزیولوژی
تریپسین پپتیدها را در سمت انتهایی C باقی مانده های لیزین و آرژنین می شکافد. اگر یک مانده اسیدی در دو طرف محل شکاف باشد سرعت هیدرولیز این واکنش کاهش می یابد و اگر یک باقیمانده پرولین در سمت کربوکسیل محل شکاف باشد هیدرولیز متوقف می شود. pH مطلوب برای فعالیت تریپسین 9-7 است. تریپسین همچنین می تواند برای از بین بردن پیوندهای استر و آمید از مشتقات مصنوعی اسیدهای آمینه عمل کند. EDTA به عنوان ماده ای كلاته كننده كه خنثی كننده یون های كلسیم و منیزیم است و پیوندهای پپتیدی را كه تریپسین بر روی آنها عمل می كند پنهان می كند به محلول های تریپسین اضافه می شود. حذف این یونها فعالیت آنزیمی را افزایش می دهد.
مهارکننده های پروتئیناز سرین از جمله DFP ، TLCK ، APMSF ، AEBSEF و آپروتینین از جمله ، تریپسین را مهار می کند.
احتیاط محلول تریپسین
این محصول بین 10- و -40 درجه سانتیگراد به صورت منجمد نگهداری می شود. از منجمد وذوب کردن مداوم باید خودداری شود.
آماده سازی محلول تریپسین
این محصول حاوی فنل قرمز است. به دلیل حمل و نقل روی یخ خشک ممکن است دی اکسید کربن قابل توجهی در بسته وجود داشته باشد. این CO2 ممکن است وارد محلول شود و PH را اندکی کاهش دهد و به جای نارنجی مایل به رنگ نارنجی باشد. محلول نارنجی همچنان برای استفاده مناسب خواهد بود یا می توان PH را با هیدروکسید سدیم تنظیم کرد. انکوباسیون سلول با غلظت تریپسین بیش از حد برای مدت طولانی می تواند به غشای سلول آسیب برساند و سلول را از بین ببرد. محلول كردن تریپسین یا رقیق كردن آن از یك محلول غلیظ باید با یك محلول نمك بافر که فاقد Ca2 + یا Mg2 + انجام شود.
نکات ایمنی محلول تریپسین
RIDADR NONH برای همه روش های حمل و نقل WGK آلمان و WGK 3Flash Point (F) قابل استفاده نیست ونقطه اشتعال ( C ) غیر قابل استفاده است.
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.