توضیحات
محیط کشت VTM مخفف محیط کشت Viral Transport Media یک وسیله حمل و نقل ویروسی (VTM) ماده مغذی است که برای حمل و حفظ قابلیت زنده ماندن نمونه ها (ویروس ها) به آزمایشگاه برای شناسایی و پردازش بیشتر نمونه مورد استفاده قرار می گیرد.
واسطه های حمل و نقل برای ویروس ها از اهمیت ویژه ای برخوردار هستند زیرا نسبت به سایر عوامل عفونی از حساسیت بیشتری برخوردار هستند.
احتمال جداسازی موفقیت آمیز هنگامی افزایش می یابد که فاصله زمانی بین جمع آوری و تلقیح کشت کمتر باشد و هنگامی که نمونه حاوی ذرات ویروس بیشتر باشد.
به منظور به حداکثر رساندن میزان ویروس در نمونه ، جمع آوری نمونه باید در اوایل بیماری بیمار انجام شود.
جداسازی های موفقیت آمیز و قابل اعتماد از ویروس ها می تواند در صورت استفاده از یک وسیله حمل و نقل مناسب انجام شود.
وقتی نمونه های ویروسی به آزمایشگاه محلی یا آزمایشگاه مرجع ارسال می شوند ، تعداد انزوا نیز افزایش می یابد.
طرز تهیه محیط کشت Viral Transport Media
فعالیت ویروس را حتی در دمای اتاق حفظ می کند.
این برای کشتهای سلولی غیر سمی است و ظاهر اثرات سیتوپاتیک ویروسی را پنهان نمی کند.
ماندگاری طولانی خواهد داشت (چه در حالت یخ زده و چه در حالت منجمد).
هم برای جداسازی های کشت و هم برای آزمایش های مستقیم مانند آزمایش سنجش آنزیمی یا ایمونوفلورسانس قابل استفاده است.
به منظور دستیابی به تمام خصوصیات فوق الذکر ، محیط های انتقال ویروس معمولاً دارای یک جز protein پروتئینی محافظ ، عوامل ضد میکروبی برای جلوگیری از احتمال آلودگی و بافرهایی هستند که pH محلول را حفظ می کنند.
برخی از VTM ها همچنین یونها و مواد معدنی اضافی دارند که به حفظ دوام این نمونه ها کمک می کنند.
روش آماده سازی محیط کشت VTM های برای سواب های بینی و گلو از انسان
10 گرم آب انفوزیون گوساله و 2 گرم بخش آلبومین گاو V به آب مقطر استریل (به 400 میلی لیتر) اضافه کنید.
0.8 میلی لیتر محلول جنتامایسین سولفات (50 میلی گرم در میلی لیتر) و 3.2 میلی لیتر آمفوتریسین B (250 میکروگرم در میلی لیتر) اضافه کنید –
با فیلتراسیون استریل کنید.
در زیر روش دقیق تری برای تهیه حجم بیشتری از VTM برای انسان وجود دارد:
500 میلی لیتر سرم گاوی جنین (FBS) را با حرارت دادن به مدت 30 دقیقه در حمام آب در 56.0 درجه سانتی گراد +/- 1.0 درجه سانتیگراد غیرفعال کنید. در صورت وجود از FBS غیرفعال شده تجاری استفاده کنید.
50 میلی لیتر آمفوتریسین B اضافه کنید ، 50 میلی لیتر جنتامایسین به FBS غیرفعال اضافه کنید و سپس محلول را از طریق یک فیلتر واحد 0.20 تا 0.45 میکرومتر (واحد فیلتر 150 میلی لیتر) فیلتر کنید.
10 میلی لیتر FBS را به 500 میلی لیتر محلول نمک متعادل Hanks (HBSS) اضافه کنید.
2 میلی لیتر از مخلوط جنتامایسین / آمفوتریسین B را به HBSS که قبلاً تشکیل شده است با FBS اضافه کنید.
محلول های بطری ها و بطری ها را پراکنده کنید. با وارونه سازی بطری مخلوط کنید.
بطری را بهمراه تاریخ تولید ، مواد افزودنی و تاریخ انقضا برچسب بزنید.
مقدار 3 میلی لیتر از محیط را در لوله های پیچ دار مخروطی استریل جداگانه (مانند لوله های 16×100 میلی متر) اندازه گیری کنید. درب ظرف را پس از توزیع محکم بسته نگه دارید. روی ظروف را با اطلاعات لازم برچسب گذاری کنید.
در دمای 8-2 درجه سانتی گراد نگهداری شود.
روش آماده سازی محیط کشت VTM برای نمونه از حیوانات:
برای جمع آوری و حمل نمونه ها در حیوانات ، می توان از دو نوع VTM استفاده کرد.
واسطه حمل و نقل 199 به طور گسترده ای برای جمع آوری و حمل نمونه های بالینی از همه گونه ها استفاده می شود.
محیط دوم ، واسطه حمل و نقل PBS-گلیسرول ، که محیط مبتنی بر گلیسرول است ، ثبات طولانی مدت نمونه ها را فراهم می کند که در آن زمان خنک سازی بلافاصله امکان پذیر نیست.
برای تلقیح تخم مرغ مناسب است اما برای تلقیح کشت بافت مناسب نیست
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.