توضیحات
محیط کشت HAT یکی دیگر از انواع محیط کشت هایی می باشد که در بازار موجود می باشد و می تواند برای تست در یک محیط آزمایشگاهی مورد استفاده قرار بگیرد بهتر است بدانید هر محیط کشت با توجه به ویژگی هایی که دارد می تواند برای یک محیط آزمایشگاهی مناسب باشد امروزه بیش از 1000 نوع از محیط کشت در بازار موجود می باشد ه شما می توانید حسب نیاز خود از آنها استفاده نمایید ما در ادامه قصد داریم در مورد محیط کشت HAT اطلاعاتی را در اختیار شما قرار دهیم در صورتی که نیاز به خرید محیط کشت HAT دارید یا می خواهید اطلاعات جامعتری را بدست آورید می توانید تا انتهای این راهنما با ما همراه باشید
محیط کشت HAT چیست ؟
محیط کشت HYPOXANTHINE AMINOPTERIN THYMIDINE که به اختصار محیط کشت HAT نیز نامیده می شود نوعی محیط کشت می باشد که برای تولید آنتی بادی های مونوکلونال شامل ادغام سلول های میلوما با سلول های طحال و انتخاب هیبریدوم ها (هیبریدهای سلولی) در کشت هیپوگزانتین-آمینوپترین-تیمیدین (HAT) رسانه تکمیل شده آمینوپترین مسدود شده مورد استفاده قرار می گیرد در ادامه سنتز DNA با مهار دی هیدروفولات ردوکتاز 3 سلول هایی که توانایی استفاده از مسیر نجات را ندارند برای سنتز نوکلئوتید حذف می شوند. سلول هایی که دارای هیپوگزانتین-گوانین فسفریبوزیل است ترانسفراز (HPRTase) و تیمیدین کیناز (TK) آنزیم ها می توانند از مسیر نجات در صورت عرضه استفاده کنند
هدف محیط کشت HAT
محیط HAT برای تهیه آنتی بادی های مونوکلونال استفاده می شود. این فرآیند فناوری هیبریدوما نامیده می شود. حیوانات آزمایشگاهی ابتدا در معرض آنتی ژنی قرار می گیرند که ما علاقه مند به جداسازی آنتی بادی علیه آن هستیم. هنگامی که اسپلنوسیت ها از پستاندار جدا شدند، سلول های B با سلول های میلومای HGPRT منفی و جاودانه با استفاده از پلی اتیلن گلیکول یا ویروس سندای ترکیب می شوند. سلول های ذوب شده در محیط HAT انکوبه می شوند. آمینوپترین موجود در محیط، مسیر de novo را مسدود می کند. از این رو، سلول های میلوما ذوب نشده می میرند، زیرا نمی توانند نوکلئوتیدها را از طریق مسیر de novo یا نجات تولید کنند. سلول های B ادغام نشده می میرند زیرا عمر کوتاهی دارند. به این ترتیب، تنها هیبریدهای سلول B-میلوما زنده می مانند. این سلول ها آنتی بادی تولید می کنند (ویژگی سلول های B) و جاودانه هستند (ویژگی سلول های میلوما). سپس محیط انکوبه شده در صفحات چند چاهی به حدی رقیق می شود که هر چاهک فقط دارای 1 سلول باشد. سپس مایع رویی در هر چاهک را می توان از نظر آنتی بادی مورد نظر بررسی کرد. از آنجایی که آنتی بادی های موجود در یک چاه توسط همان سلول B تولید می شوند، به سمت همان اپی توپ هدایت می شوند و به عنوان آنتی بادی های مونوکلونال شناخته می شوند.
فرم محیط کشت HAT
پودر سفید تا مایل به سفید
حلالیت (در 10 میلی لیتر آب)
مایع بی رنگ تا زرد کم رنگ و شفاف
عقیمی
استریل (با تابش گاما)
اندوتوکسین
≤100EU/ml
هر ویال حاوی
هیپوگزانتین: 6.8 میلی گرم آمینوپترین: 0.088 میلی گرم تیمیدین: 1.94 میلی گرم
دستورالعمل های آماده سازی محیط کشت HAT
ویال را با آب استریل به حجم 10 میلی لیتر برسانید تا محلولی 50X حاوی 0.005M هیپوگزانتین، 0.00005M آمینوپترین و 0.0008M تیمیدین بدست آید. هنگامی که 10 میلی لیتر از کنسانتره 50X با محیط کشت بافت استریل به 500 میلی لیتر رقیق می شود، غلظت نهایی هیپوگزانتین، آمینوپترین و تیمیدین به ترتیب 100uM، 0.4uM و 16uM است.
ذخیره سازی و پایداری
محصول لیوفیلیزه را قبل از بازسازی در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری کنید. پودر لیوفیلیزه پس از دریافت به مدت 6 ماه در دمای 20 درجه سانتی گراد پایدار است. پس از بازسازي تا 10 ميلي‌ليتر، استاك غليظ شده را مي‌توان در -20 درجه سانتيگراد نگهداري كرد.
خرید محیط کشت HAT
برای خرید محیط کشت HAT می توانید از دو روش خرید اینترنتی و مراجعه حضوری انتخاب نمایید لازم به ذکر می باشد قبلا مراجعه حضوری به دفتر ماینو لب ابتدا جهت موجودی محیط کشت با ما در تماس باشید تا در صورت عدم موجودی به شما در مورد نبودن کالا اطلاع دهیم همچنین شما می توانید با مراجعه به اینترنت و سرچ محیط کشت HAT نسبت به خرید این محیط کشت اقدام نمایید
قیمت محیط کشت HAT
جهت استعلام قیمت این محیط کشت با شماره های مندرج در وب سایت با ما در تماس باشید تا همکاران ما لیست قیمت را در اختیار شما قرار دهند
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.